Transformation af E.coli med plasmider

I dette forsøg (Edvotek kit nr. 222) indsættes to forskellige plasmider i E. coli, som giver henholdsvis grønt og blåt fluorescerende protein. Koloniernes fænotypiske forskelle kan ses på farven og fremtræder tydeligst under langt UV-lys. Transformanter selekteres på LB-agar med ampicillin. Kittet rækker til 10 grupper; forsøget tager cirka 45 minutter plus inkubation natten over. Krævet udstyr omfatter inkubator, 1–2 vandbade, varmekilde, mikropipetter (5–50 µl) med spidser, pipettesuger, markeringspenne, varmeresistente handsker, isbad og UV-lyskilde. Transformationscellerne er frysetørrede, hvilket giver cirka ni måneders holdbarhed. Seneste øvelsesvejledning hentes via link fra kassen. For spektrofotometri kan fluorescens fra det grønne protein måles ved excitation 473 nm og emission 509 nm.

Ved undervisningsbrug i Danmark gælder særlige regler: Forsøg med GMO skal varetages af en gymnasielærer med dokumenteret kursus i mikrobiologiske metoder, genteknologi og affaldshåndtering, og eksperimentet skal indberettes til fagkonsulenten senest to uger før gennemførelse efter gældende bilag og skemaer.

Anvendelse af produktet

I biologi og bioteknologi giver øvelsen hænd-på-erfaring med plasmidtransformation, selektion og fenotypisk screening, som styrker forståelsen af genudtryk og antibiotikaresistensmarkører. Resultaterne kan kobles til begreber som promotorstyring og proteiners fluorescens. Arbejdsgangen svarer til basale procedurer i mikrobiologiske og bioteknologiske laboratorier, hvor transformation bruges til kloning og proteinproduktion.

 

VÆR OPMÆRKSOM PÅ:

Dette forsøg står på listen over genteknologiske forsøg - se undervisningsministeriets hjemmeside.

Ønsker man at lave et genteknologiske forsøg med sine elever skal det indberettes til fagkonsultenten i biologi senest 14 dage før forsøget ønskes udført.
Ansvarlig underviser skal have gennemgået et kompetencegivende kursus for at kunne udføre eksperimentet. 
Find mere information om kompetencegivende kurser, tidsfrister og indberetning her: 

Dette forsøg står på listen over genteknologiske forsøg - se undervisningsministeriets hjemmeside: https://emu.dk/stx/biologi/fra-fagkonsulenten/nyt-fra-fagkonsulenten-i-biologi-indberetning-af-genteknologisk 

Ønsker man at lave et genteknologiske forsøg med sine elever skal det indberettes til fagkonsultenten i biologi senest 14 dage før forsøget ønskes udført.
Ansvarlig underviser skal have gennemgået et kompetencegivende kursus for at kunne udføre eksperimentet. 
Find mere information om kompetencegivende kurser, tidsfrister og indberetning her:

Specifikationer

Brand: Edvotek