I dette forsøg (Edvotek kit nr. 222) indsættes to forskellige plasmider i E. coli, som giver henholdsvis grønt og blåt fluorescerende protein. Koloniernes fænotypiske forskelle kan ses på farven og fremtræder tydeligst under langt UV-lys. Transformanter selekteres på LB-agar med ampicillin. Kittet rækker til 10 grupper; forsøget tager cirka 45 minutter plus inkubation natten over. Krævet udstyr omfatter inkubator, 1–2 vandbade, varmekilde, mikropipetter (5–50 µl) med spidser, pipettesuger, markeringspenne, varmeresistente handsker, isbad og UV-lyskilde. Transformationscellerne er frysetørrede, hvilket giver cirka ni måneders holdbarhed. Seneste øvelsesvejledning hentes via link fra kassen. For spektrofotometri kan fluorescens fra det grønne protein måles ved excitation 473 nm og emission 509 nm.
Ved undervisningsbrug i Danmark gælder særlige regler: Forsøg med GMO skal varetages af en gymnasielærer med dokumenteret kursus i mikrobiologiske metoder, genteknologi og affaldshåndtering, og eksperimentet skal indberettes til fagkonsulenten senest to uger før gennemførelse efter gældende bilag og skemaer.
VÆR OPMÆRKSOM PÅ SPECIELLE LOVKRAV TIL ANVENDELSEN AF DETTE KIT:
Brugen af dette kit til undervisningsbrug skal varetages af en gymnasielærer, der har gennemgået et kompetencegivende kursus af 2 dages varighed. Kurset omfatter arbejde med mikrobiologiske arbejdsmetoder, herunder sterilteknik og genteknologiske undersøgelsesmetoder, undervisning i god laboratoirepraksis samt affaldshåndtering.
Kurset udbydes af FaDB jf. https://biofag.dk/?page_id=2
Senest to uger før udførelsen af eksprimenter med genteknologisk modificerede organismer indberettes det planlagte eksperiment til fagkonsulent via fællespostkassen [email protected]. Skema til indberetning består af en forside (bilag 6) og en bilagsdel (bilag 1-4). Skema til indberetning af eksperimenter findes på Børne- og Undervisningsministeriets hjemmeside på https://www.uvm.dk/gymnasiale-uddannelser/fag-og-laereplaner/stx-laereplaner under bioteknologi.
De godkendte forsøg fremgår af bilagene til indberetningsskemaet, se aftalens bilag 1-4 jf. Indberetningsskema – bilag (pdf) på https://www.uvm.dk/gymnasiale-uddannelser/fag-og-laereplaner/stx-laereplaner under bioteknologi.
Anvendelse af produktet
I biologi og bioteknologi giver øvelsen hænd-på-erfaring med plasmidtransformation, selektion og fenotypisk screening, som styrker forståelsen af genudtryk og antibiotikaresistensmarkører. Resultaterne kan kobles til begreber som promotorstyring og proteiners fluorescens. Arbejdsgangen svarer til basale procedurer i mikrobiologiske og bioteknologiske laboratorier, hvor transformation bruges til kloning og proteinproduktion.
Specifikationer
Brand: Edvotek 
